通用名稱：非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測試劑盒

英文名稱：African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit

本試劑盒可用于血液、脾臟、肝臟、淋巴結、扁桃體、腎臟、肌肉、環(huán)境樣品等樣品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測。

1. 試驗有效性判定

陽性對照FAM和HEX通道均有典型擴增曲線且Ct值≤30，且陰性對照無Ct值或無擴增曲線，線形為直線或輕微斜線，無指數(shù)增長期。則判試驗結果有效。否則，此次試驗視為無效。

2. 樣品判定

陽性：樣本檢測結果Ct值≤35且有明顯指數(shù)增長期，判定檢出非洲豬瘟病毒核酸。

可疑：樣本檢測結果Ct值在35～38范圍內。此時應對樣本進行重復檢測，如果重復實驗結果Ct值仍在35～38范圍內，有明顯指數(shù)增長期，則判定為陽性，否則為陰性。

陰性：樣本檢測結果Ct值＞38或無Ct值，判定未檢出非洲豬瘟病毒核酸。

污染：樣品中HEX通道檢測結果Ct值≤35且有明顯指數(shù)增長期，判定陽性對照對空氣或樣品產(chǎn)生污染，樣品檢測無效，應盡快消除污染源。

1. 實驗前請仔細閱讀本試劑盒說明書，嚴格按照操作步驟執(zhí)行，在操作過程中對時間、試劑體積等精確控制可以獲得最好的結果。

2. 實驗室應嚴格按照有關規(guī)定分區(qū)管理，依照配液區(qū)→模板提取區(qū)→擴增區(qū)→分析區(qū)順序進行基因檢測。各區(qū)間人員、器材、試劑及空氣流向應有嚴格要求。

3. 核酸提取有關耗材確保潔凈、無DNase/RNase，提取過程盡量低溫、快速，完成后進入下一步實驗或凍保。

4. 對于頂部采光儀器要帶新的一次性PE手套對熒光PCR管封蓋，對于底部采光儀器要避免徒手或使用過的手套接觸熒光PCR管底，檢測過程中使用不帶熒光物質一次性乳膠手套。

5. 凍存試劑使用前應于室溫下完全融化，瞬時離心使液體完全沉于管底。避免反復凍融，以免影響試劑性能。

6. 樣品、陽性對照等在使用后及時封蓋，避免組分間及氣溶膠等的污染造成假陽性。

7. 擴增產(chǎn)物禁止開蓋，實驗產(chǎn)生的廢棄物應及時收集，遠離PCR實驗室進行無害化處理。